Isolation and characterization of farm pig adipose tissue-derived mesenchymal stromal/stem cells

Adipose tissue-derived mesenchymal stromal/stem cells (ASCs) are considered important tools in regenerative medicine and are being tested in several clinical studies. Porcine models are frequently used to obtain adipose tissue, due to the abundance of material and because they have immunological and physiological similarities with humans. However, it is essential to understand the effects and safe application of ASCs from pigs (pASCs) as an alternative therapy for diseases. Although minipigs are easy-to-handle animals that require less food and space, acquiring and maintaining them in a bioterium can be costly. Thus, we present a protocol for the isolation and proliferation of ASCs isolated from adipose tissue of farm pigs. Adipose tissue samples were extracted from the abdominal region of the animals. Because the pigs were not raised in a controlled environment, such as a bioterium, it was necessary to carry out rigorous procedures for disinfection. After this procedure, cells were isolated by mechanical dissociation and enzymatic digestion. A proliferation curve was performed and used to calculate the doubling time of the population. The characterization of pASCs was performed by immunophenotyping and cell differentiation in osteogenic and adipogenic lineages. The described method was efficient for the isolation and cultivation of pASCs, maintaining cellular attributes, such as surface antigens and multipotential differentiation during in vitro proliferation. This protocol presents the isolation and cultivation of ASCs from farm pig as an alternative for the isolation and cultivation of ASCs from minipigs, which require strictly controlled maintenance conditions and a more expensive process.

Avaliação dos perfis minerais séricos, urinários e sedimentares de ovinos recebendo dieta calculogênica / Evaluation of mineral profile in serum, urine and sediment of sheep receiving calculogenic diet

A urolitíase obstrutiva em pequenos ruminantes é uma doença metabólica de etiologia multifatorial com distribuição mundial. A elevação da concentração urinária de solutos, minerais ionizados (cristaloides) que formam cristais insolúveis é citada por alguns autores como o fator mais importante. Assim, o conhecimento do perfil mineral dos animais submetidos a dietas calculogênicas e a composição química dos urólitos tornam-se ferramentas eficazes na prevenção da doença. Neste estudo, foram utilizados 14 ovinos hígidos, machos (não castrados), da raça Santa Inês, com idade aproximada de 90 dias, distribuídos em dois grupos (G1 - sem vitamina C e G2 - com vitamina C) e alimentados com dieta calculogênica. A análise dos perfis minerais, séricos e urinários revelou completo desbalanceamento na relação entre concentrações de cálcio, fósforo e magnésio, havendo elevação expressiva do fósforo e do magnésio e diminuição substancial do cálcio. Com isso, a análise bioquímica dos urólitos demonstrou que o cálcio esteve presente em 50% das amostras analisadas.(AU)

Urolithiasis in small ruminants is a metabolic disease of multifactorial etiology with worldwide distribution. Increased urinary concentration of solutes, ionized minerals (crystalloid) that form insoluble crystals is cited by some authors as the most important factor. Thus, knowledge of mineral profile of the animals fed calculogenic diets and chemical composition of uroliths becomes an effective tool in preventing the disease. In this study, we used 14 healthy, male, non-neutered sheep, of the Santa Ines breed, aged approximately 90 days, divided into two groups (G1-without vitamin C and G2-with vitamin C) fed calculogenic diet. Analysis of mineral profiles in serum and urine revealed complete imbalance in the relationship between concentrations of calcium, phosphorus and magnesium, with significant increase of phosphorus and magnesium and substantial reduction of calcium. Thus, biochemical analysis of uroliths showed that calcium was present in 50% of samples.(AU)

In vitro rumen fermentation kinetics of diets containing oldman saltbush hay and forage cactus, using a cattle inoculum / Cinética de fermentação ruminal in vitro de dietas contendo feno de erva-sal e palma forrageira, utilizando inóculo bovino

The aim of this experiment was to evaluate, by means of the semi-automated in vitro gas production technique, fermentation kinetics of carbohydrates and degradability of dry matter (DM) and organic matter (OM) of diets containing oldman saltbush hay levels (8.4; 18.8; 31.2 and 48.3%) associated to forage cactus in natura. Pressure readings of the gases were done with a pressure transducer at 2, 4, 6, 8, 10, 12, 17, 20, 24, 28, 34, 48, 72 and 96h post-inoculation. The rumen kinetics was described by the following parameters: maximum potential of gas production, lag time and production rates of gas (k), fibrous carbohydrates (FC) and non-fibrous carbohydrates (NFC). It could be observed that the addition of oldman saltbush hay to the diets promoted a quadratic effect in the production of gases originated from NFC. However, there was no significant effect on the production of gases originated from FC and on production rates of gases from NFC and FC. The degradability of DM and OM did not differ due to the addition of oldman saltbush hay. The use of 8.4% hay and 74.9% forage cactus promoted the maximum potential of production of gases from the fibrous fraction of diets containing cactus and oldman saltbush hay.

O objetivo deste experimento foi avaliar, por meio da técnica in vitro semiautomática de produção de gases, a cinética de fermentação dos carboidratos e a degradabilidade da matéria seca (MS) e da orgânica (MO) de dietas contendo níveis de feno de erva-sal (8,4; 18,8; 31,2 e 48,3%) associado à palma forrageira in natura. As leituras de pressão dos gases foram feitas com transdutor de pressão às 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 17, 20, 24, 28, 34, 48, 72, 96 horas pós-inoculação. A cinética ruminal foi descrita pelos parâmetros: potencial máximo de produção de gases, "lag time" e taxa de produção de gases (k) dos carboidratos fibrosos (CF) e não fibrosos (CNF). Verificou-se que a adição de feno de erva-sal às dietas promoveu efeito quadrático na produção de gases provenientes dos CNF, em que o menor valor observado (136,48mL) foi encontrado com a adição de 38,25% de feno, e o maior valor, com a adição de 8,4% de feno e 74,9% de palma forrageira. O tempo de latência teve comportamento quadrático em função da adição de feno. No entanto não houve efeito significativo na produção de gases provenientes dos CF (média de 111,6mL) e nas taxas de produção de gases dos CNF e CF que apresentaram média de 0,090h-1 e 0,028h-1, respectivamente. A degradabilidade da MS e MO não diferiram em função da adição de feno de erva-sal e apresentaram médias de 85,8 e 90,9%, respectivamente. O uso de 8,4% de feno e 74,9 de palma forrageira propiciou o máximo potencial de produção de gases da fração fibrosa de dietas contendo palma e feno de erva-sal.

Low-level laser therapy decreases local effects induced by myotoxins isolated from bothrops jararacussu snake venom

The prominent myotoxic effects induced by Bothrops jararacussu crude venom are due, in part, to its polycationic myotoxins, BthTX-I and BthTX-II. Both myotoxins have a phospholipase A2 structure: BthTX-II is an active enzyme Asp-49 PLA2, while BthTX-I is a Lys-49 PLA2 devoid of enzymatic activity. In this study, the effect of low-level laser therapy (LLLT), 685 nm laser at a dose of 4.2 J/cm2 on edema formation, leukocyte influx and myonecrosis caused by BthTX-I and BthTX-II, isolated from Bothrops jararacussu snake venom, was analyzed. BthTX-I and BthTX-II caused a significant edema formation, a prominent leukocyte infiltrate composed predominantly by neutrophils and myonecrosis in envenomed gastrocnemius muscle. LLLT significantly reduced the edema formation, neutrophil accumulation and myonecrosis induced by both myotoxins 24 hours after the injection. LLLT reduced the myonecrosis caused by BthTX-I and BthTX-II, respectively, by 60 and 43 percent; the edema formation, by 41 and 60.7 percent; and the leukocyte influx, by 57.5 and 51.6 percent. In conclusion, LLLT significantly reduced the effect of these snake toxins on the inflammatory response and myonecrosis. These results suggest that LLLT should be considered a potential therapeutic approach for treatment of local effects of Bothrops species venom.

Anti-inflammatory activity of Blutaparon portulacoides ethanolic extract against the inflammatory reaction induced by Bothrops jararacussu venom and isolated myotoxins BthTX-I and II

This article reports the anti-inflammatory effect of Blutaparon portulacoides (B. portulacoides), specifically the ethanolic extract of its aerial parts, on the edema formation and leukocyte influx caused by Bothrops jararacussu (B. jararacussu) snake venom and Bothropstoxin-I and II (BthTX-I and II) isolated from this venom as an alternative treatment for Bothrops snakebites. The anti-inflammatory effect of B. portulacoides ethanolic extract was compared with an animal group pretreated with dexamethasone. B. portulacoides ethanolic extract significantly inhibited paw edema induced by B. jararacussu venom and by BthTX-I and II. Also, results demonstrated that the extract caused a reduction of the leukocyte influx induced by BthTX-I. However, the extract was not capable of inhibiting the leukocyte influx induced by the venom and by BthTX-II. In conclusion, these results suggest that the ethanolic extract of this plant possess components able to inhibit or inactivate toxins present in B. jararacussu venom, including its myotoxins, responsible for the edema formation. However, the leukocyte migration caused by the venom and BthTX-II was not inhibited by the plant, probably due to the different mechanisms involved in the edema formation and leukocyte influx. This is the first report of B. portulacoides extract as anti-inflammatory against snake venoms and isolated toxins.(AU)

Efeito do fósforo disponível de seis fontes de fósforo sobre o crescimento de frangos de corte / Effect of available phosphorus from six phosphorus sources on broiler growth

Com os valores de biodisponibilidade de fósforo (BDP) previamente determinados em três fontes naturais e três industriais, foi realizado um experimento com o objetivo de comparar o desempenho de frangos de corte em crescimento (de um a 28 dias de idade). As fontes naturais foram fosfato Arafértil (FAC), fosfato Goiasfértil (FRG) e fosfato de Patos de Minas (FPM) e as industriais, fosfato bicálcico (FBI), farinha de ossos calcinada (FOC) e fosfato monoamônio (FMA). Foram usados 390 pintos distribuídos em 13 tratamentos experimentais e três repetiçöes de 10 aves (cinco machos e cinco fêmeas), em um delineamento inteiramente casualizado. As aves alojadas em baterias metálicas, receberam água e raçöes experimentais isofosfóricas contendo 0,45 por cento de fósforo disponível oriundo das fontes avaliadas ou do fosfato monosódico como padräo. Somente para ganho de peso houve diferença significativa entre tratamentos, quando as aves receberam FPM para fornecer 100 por cento do fósforo disponível. Näo houve diferença significativa para ganho de peso entre os outros tratamentos, nem para consumo de raçäo e conversäo alimentar semanal, bem como para os teores de cinzas, cálcio e fósforo nos ossos, entre todos os tratamentos. Os fosfatos elaborados apresentaram teor de flúor nos ossos inferior àquele dos fosfatos naturais. Os resultados permitem concluir que o emprego dos fosfatos de rocha na alimentaçäo de frangos de corte requer prévia avaliaçäo das suas BDP e do seu conteúdo de flúor e que o emprego de fosfatos naturais deve ser limitado a níveis que näo resultem em excesso de flúor, prejudicando o desempenho de frangos de corte em crescimento

Biodisponibilidade relativa de fósforo em seis fontes industriais e naturais para frangos de corte / Phosphorus availability in six phosphorus sources for chickens

Usando pintos de corte de um a 21 dias de idade, determinou-se a biodisponibilidade de fósforo (BDP) de seis fontes de fósforo, sendo três industriais - fosfato bicálcio (FBI), farinha de ossos calcinada (FOC) e fosfato monoamônio (FMA) - e três naturais - fosfato acidulado (FAC), fosfato concentrado de rocha de Goiás (FRG) e fosfato de Patos de Minas (FPM), tendo-se o fosfato monosódico (NaH2PO4.H2O) como padräo ou referência. Os valores de BDP foram obtidos pelos critérios do ganho de peso, teor de cinzas ósseas, teores de cálcio e de fósforo nos ossos, aplicando-se os métodos da abscissa e o da relaçäo dos coeficientes de inclinaçäo da curva de regressäo múltipla (slope ratio). O valor médio das BDP dos fosfatos industriais foi 76 por cento superior ao dos naturais, independentemente dos parâmetros considerados e métodos de cálculos aplicados. Os valores médios (porcentagem), considerando todos os critérios e métodos foram: FBI=96,9; FOC=92,1; FMA=103,3; FA=63,1; FRG=55,0; FPM=47,5. Sugere-se a necessidade de métodos mais precisos de avaliaçäo da BDP, bem como de mensuraçöes dos efeitos do flúor presente sobre a BDP das fontes de fósforo de interesse na alimentaçäo animal